動(dòng)物模型構建平臺

_{大鼠急性肝損傷模型}

 

一． 主要試劑及耗材：
8周齡雄性SD大鼠
對乙酰氨基酚（阿拉丁，A105808）
血生化儀（HITACHI，7100）
PBS（南京生興生物，SN331）

二． 實(shí)驗方法：
正式實(shí)驗開(kāi)始前，大鼠禁食12h，然后對乙酰氨基酚組（即模型組）給予450mg/kg的對乙酰氨基酚溶液(用40℃生理鹽水配制)灌胃，空白對照組則采用相等容量的生理鹽水灌胃。
空白對照組：大鼠毛發(fā)光滑，好動(dòng)，食欲佳；對乙酰氨基酚組（即模型組）大鼠精神萎靡，活動(dòng)欠佳，食欲減退。
肝組織損傷程度病理學(xué)分級標準：0度（-）：肝細胞、肝細胞索、肝竇均正常，未見(jiàn)肝細胞水腫或空泡的異常改變；1度（+）：在一個(gè)肝小葉中，有1/3以?xún)雀渭毎[，中央靜脈周?chē)母渭毎藵馊境珊谏炭s，分布散在；2度（++）：在一個(gè)肝小葉中，有1/3～1/2以?xún)鹊母渭毎[，肝細胞明顯疏松化，中央靜脈周?chē)霈F點(diǎn)狀壞死，分布較廣，匯管區有少量炎細胞浸潤；3度（+++）：在一個(gè)肝小葉中，有1/2以上的肝細胞水腫，肝細胞氣球樣變，匯管區出現炎細胞浸潤，點(diǎn)狀壞死灶。
 
 
 
三． 實(shí)驗結果

3.1 生化檢測

圖：各組ALT、AST、ALP、TBIL和DBIL濃度
 

由上圖可見(jiàn)，與正常組比，ALT、AST、ALP、TBIL和DBIL 造模后表達明顯上升。其中ALT、AST和TBIL在24h小時(shí)后表達最高。ALP在1h 表達最高隨后開(kāi)始下降，36h表達最低。圖中統計為實(shí)驗組與正常組使用T檢驗進(jìn)行統計比較。*表示 P<0.05；**表示P<0.01。

3.2HE染色檢測
 

空白對照組大鼠肝臟組織結構正常，肝索呈放射狀排列整齊，胞漿著(zhù)色均勻，細胞核清晰。對乙酰氨基酚組可見(jiàn)肝小葉中央實(shí)質(zhì)細胞碎片狀壞死，肝小葉結構不清，肝索排列紊亂，肝細胞水腫，胞漿內空泡樣變性；可見(jiàn)新生肝細胞，核仁明顯，少數雙核的新生肝細胞。小葉內可見(jiàn)炎癥細胞浸潤，其中以淋巴細胞為主，發(fā)生碎片狀壞死病灶處炎癥細胞浸潤明顯。