江蘇省南京市棲霞區和燕路371號 東南大學(xué)國家大學(xué)科技園科創(chuàng )樓A301
一、實(shí)驗原理
懸尾實(shí)驗(The Tail Suspension Test,TST)是一項小鼠行為測試,可用于篩選潛在的抗抑郁物,以及評估預期會(huì )影響抑郁相關(guān)行為的實(shí)驗方法。
將實(shí)驗動(dòng)物通過(guò)固定動(dòng)物尾部使其頭向下懸掛,動(dòng)物在該環(huán)境中拼命掙扎試圖逃跑又無(wú)法逃脫,從而提供了一個(gè)無(wú)可回避的壓迫環(huán)境,一段時(shí)間的實(shí)驗后, 記錄處于該環(huán)境的動(dòng)物產(chǎn)生絕望的不動(dòng)狀態(tài)過(guò)程中的一系列參數,動(dòng)物的表現出的這種典型的“不動(dòng)狀態(tài)”,反映了一種被稱(chēng)之為“行為絕望狀態(tài)”,這種行為絕望模型與抑郁癥類(lèi)似,而且對絕大多數抗抑郁物敏感,而且其藥效與臨床藥效顯著(zhù)相關(guān),所以被廣泛用于抗抑郁物的初選。
二、實(shí)驗方法及注意事項
TST 懸尾實(shí)驗不建議用較重的大鼠,因為大鼠只能通過(guò)它們的尾巴來(lái)支持它們的體重,這對大鼠來(lái)說(shuō)是痛苦的。同樣的道理,應該注意避免使用異常重的小鼠(例如用于模擬肥胖的小鼠),在這種情況下,實(shí)驗者應該尋找替代性的測試,例如強迫游泳實(shí)驗。
動(dòng)物從居住環(huán)境帶入實(shí)驗環(huán)境應適應一段時(shí)間,通常至少一個(gè)小時(shí)。
實(shí)驗環(huán)境應保持安靜,突然大的噪音會(huì )使小鼠驚慌失措。
使用軟件分析時(shí),選擇*佳對比度的背景:白鼠使用黑色背景,黑鼠使用白色背景;也可選擇使用由上海欣軟信息科技有限公司生產(chǎn)的帶背光板的專(zhuān)業(yè)懸尾實(shí)驗設備;對老鼠的顏色沒(méi)有要求,更可拍攝出高質(zhì)量,高對比度的實(shí)驗錄像。
每只小鼠的實(shí)驗空間多大?參考空間在 55 高*15 寬*11.5 cm 左右,多通量實(shí)驗時(shí),為防止動(dòng)物彼此觀(guān)察或互相影響,中間用隔板隔開(kāi);動(dòng)物懸掛在隔間中間,寬度和深度足夠大,不能與墻壁接觸。
懸掛后動(dòng)物鼻尖與設備地板之前的距離多少?參考距離在 20~25 cm 左右。
底部建議放置一個(gè)可拆卸的拖盤(pán),收集糞便或尿液。
懸掛用的膠帶應牢固地粘貼在小鼠尾部和懸掛桿上,并且足夠堅固以承受正在測試的小鼠的重量。但是,膠帶不應該過(guò)于粘滯,因為在實(shí)驗結束會(huì )從尾部移除。膠帶尺寸應統一,長(cháng)度 17 厘米,從一端 2 厘米做標記。這個(gè) 2 厘米的部分用于將膠帶連接到尾部,而剩余的 15 厘米用于懸掛小鼠;膠帶應貼在尾部的尾端,尾部留 2-3 毫米的距離。
尾巴攀爬阻止器,小鼠在實(shí)驗過(guò)程,會(huì )出現追求和攀爬它們自己的尾巴的現象,這是個(gè)普遍的問(wèn)題。解決方法很簡(jiǎn)單,而且非常有效:將一段塑料管切成 4 cm 長(cháng)中空圓柱體(內徑 1.3 cm 左右,1.5 g)放置在小鼠尾巴周?chē)湍芊乐惯@種尾巴爬行行為。注意的是,在沒(méi)有使用阻止器之前,已經(jīng)成功爬上尾巴的小鼠知道逃生是可能的。因此應將這類(lèi)小鼠排除。
分析時(shí)僅有前肢但沒(méi)有后肢介入的小動(dòng)作可判斷為不動(dòng);因慣性產(chǎn)生的擺動(dòng)可判斷為不動(dòng);
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