動(dòng)物模型構建平臺

大鼠腦性癱瘓模型的構建

腦性癱瘓：

   腦性癱瘓（Cerebral palsy，CP）簡(jiǎn)稱(chēng)腦癱，是圍產(chǎn)期胎兒中樞神經(jīng)系統損傷引起的一種非進(jìn)行性功能障礙，主要表現為中樞性運動(dòng)障礙及姿勢異常，伴有智力低下、癲癇、語(yǔ)言障礙等并發(fā)障礙。建立成功的癱瘓模型可為其發(fā)病機制的探索，治療手段的研究提供有效的手段。

實(shí)驗材料

8-10周齡SD孕鼠

脂多糖

密閉缺氧箱

體積分數為 8%和 92%氧氣、氮氣的混合氣體

構建方法

1. 孕16d母鼠給予500 μg/kg脂多糖腹腔注射，4 h后置于密閉缺氧箱中，予體積分數為8%和92%的氧氮氣混合氣體2.5h。隔天進(jìn)行1次，直至分娩；

2.  幼鼠生后第7天麻醉，碘伏消毒后，在手術(shù)顯微鏡下于頸正中做一長(cháng)0.5cm 的縱行切口，然后分離皮下組織和淺筋膜等，以絲線(xiàn)雙重結扎右側頸總動(dòng)脈并離斷，最后縫合頸部皮膚切口。

實(shí)驗結果

1.一般情況觀(guān)察：包括體重、皮膚顏色及每日活動(dòng)量等；

2.幼鼠神經(jīng)功能缺損評分(modified-neunrological severity score，mNSS) ；

3.曠場(chǎng)實(shí)驗：記錄幼鼠2min爬行距離和停頓次數；

4.病理切片驗證：幼鼠術(shù)后7d心臟灌注后斷頭，取腦組織做HE染色切片，可見(jiàn)白質(zhì)與灰質(zhì)、海馬區界限不清，海馬區無(wú)規整緊實(shí)排列的單層神經(jīng)元細胞層，神經(jīng)元數量少，發(fā)育不成熟等特點(diǎn)。

評價(jià)標準

1.有效性評價(jià)：

（1）神經(jīng)功能缺損評分（mNSS）越高，說(shuō)明模型引起的神經(jīng)功能缺損越明顯。

（2）曠場(chǎng)實(shí)驗結果顯示爬行距離減少、停頓次數增加，說(shuō)明模型對幼鼠運動(dòng)能力和行為有影響。

2.特異性評價(jià)：

病理切片驗證顯示腦組織結構異常、神經(jīng)元數量減少等病理特征，與腦性癱瘓的病理特征相符。

3.穩定性評價(jià)：

重復實(shí)驗結果具有一致性和穩定性，即不同實(shí)驗之間的數據變異較小。

4.倫理評價(jià)：

確保實(shí)驗過(guò)程符合動(dòng)物實(shí)驗倫理規范，保護動(dòng)物的權益和福利。

5.數據分析和結果解讀：

（1）數據需進(jìn)行統計學(xué)分析，確保結果具有統計學(xué)意義。

（2）結果解讀應基于實(shí)驗數據，提出科學(xué)合理的結論，并討論模型的局限性和可能的改進(jìn)方向。

通過(guò)以上詳細方案和評價(jià)標準，可以構建出更科學(xué)嚴謹的腦性癱瘓動(dòng)物模型，并對其進(jìn)行全面的評估和驗證，為該疾病的病理機制研究和治療手段開(kāi)發(fā)提供可靠的實(shí)驗基礎。