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  透射電鏡是一種高分辨率、高放大倍數的顯微鏡，是材料科學(xué)研究的重要手段，能提供極微細材料的組織結構、晶體結構和化學(xué)成分等方面的信息。透射電鏡的分辨率為0.1～0.2nm，放大倍數為幾萬(wàn)～幾十萬(wàn)倍。

　透射電子顯微鏡(Transmission Electron Microscope,簡(jiǎn)稱(chēng)TEM),可以看到在光學(xué)顯微鏡下無(wú)法看清的小于0.2um的細微結構，這些結構稱(chēng)為亞顯微結構或超微結構。要想看清這些結構，就必須選擇波長(cháng)更短的光源，以提高顯微鏡的分辨率。1932年Ruska發(fā)明了以電子束為光源的透射電子顯微鏡，電子束的波長(cháng)要比可見(jiàn)光和紫外光短得多，并且電子束的波長(cháng)與發(fā)射電子束的電壓平方根成反比，也就是說(shuō)電壓越高波長(cháng)越短。目前TEM的分辨力可達0.2nm。
 

　　透射電鏡制備注意事項(細胞)：
 

　　1、細胞數量:> 1*10的6次方;。
 

　　2、消化細胞時(shí)要注意不要過(guò)度，及時(shí)用含血清的培養液終止消化；
 

　　3、終止消化后，預冷的PBS (pH7.4 )洗細胞1-2次，離心( 1500rpm, 5min) 棄上清(細胞收集在1.5ml 的EP管中)；
 

　　4、加入1mL 2.5%戊二醛溶液(需用PBS配制該溶液)，可用吸管輕輕吹散細胞，使細胞懸浮于固定液中；
 

　　5、4度固定過(guò)夜后寄出(寄送時(shí)加冰袋,并用2.5%戊二醛溶液將EP管中剩余空間充滿(mǎn))。

 

　　透射電鏡實(shí)驗流程：
 

　　1、取材
 

　　2、固定
 

　　3、脫水
 

　　4、包埋
 

　　5、固化
 

　　6、超薄切片機切片(50-60 nm)
 

　　7、3%醋酸鈾-枸櫞酸鉛雙染色
 

　　8、透射電鏡觀(guān)察，拍片

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