江蘇省南京市棲霞區和燕路371號 東南大學(xué)國家大學(xué)科技園科創(chuàng )樓A301
動(dòng)物采血一般原則:最大采血量和頻次
給藥后,除觀(guān)察小鼠外形外,還經(jīng)常會(huì )采集血液和尿液,監測生理生化指標。
常用的小鼠采血方法有: 頜下靜脈叢采血、后肢小隱靜脈采血、眼眶后靜脈叢采血、尾尖采血、尾靜脈采血、腹主動(dòng)脈采血、心臟采血等。
實(shí)驗中進(jìn)行的采血部位有:頜下靜脈叢、后肢小隱靜脈、眼眶后靜脈叢和心臟。其中眼眶后靜脈叢及心臟采血要麻醉后進(jìn)行。
假如是終末期采血,心臟采血也可以安樂(lè )死后立即執行。
采血一般原則:
(1)采血體積和頻率的選擇取決于體循環(huán)的血容量和紅細胞更新的速度。過(guò)度采血會(huì )導致低血容量性休克、生理應激,甚至死亡。
(2)為了動(dòng)物健康,采血量應為建議最大采血體積的下限。
(3)單次采血:在不補充液體的情況下,單次采血的最大采血量約為全血量的10%,即7.7-8μL/g。如25g小鼠,大約是193-200 μL。
如果補充液體,單次采血的最大量約為血液總量的15%,即12μL/g。在25g的小鼠中,這大約是300μL。一般補充體液時(shí),應預熱后經(jīng)皮下注射。
(4)多次采血:如果實(shí)驗需要多次采血,應盡量減少采血量。每周最大采血量不超過(guò)血液總量的7.5%,為6μL/g。對于25g的小鼠,每周大約為145-150μL。如每2周采血一次,最大血容量不超過(guò)總血容量的10%, 即8μL/g。對于25g的小鼠,大約每2周200μL。
注:不允許添加非體液法采集更多血液。
(5)放血法:采用放血法采血,采血量約為血總量的一半,即40μL/g。例如25克的老鼠,每只老鼠大約等于1毫升。
一次采血量不得超過(guò)動(dòng)物血液總體積的10%。如果是多次收集,那么每次收集的體積也應滿(mǎn)足上述要求。
單次最大采血量=體重(kg) ×全身血容量(ml/kg)×10% 這個(gè)采集量可以在3-4周后再次收集。
常用動(dòng)物采血量如下:
當采血體積接近上述上限值時(shí),IACUC或獸醫可能會(huì )要求做血常規,檢測動(dòng)物的紅細胞壓積(PCV)和血紅總蛋白。在審查Animal Protocol時(shí),將提供做血常規檢測的頻率。在每一次采血后,動(dòng)物必須檢查是否有低血容量性休克和貧血的癥狀和指標。
嚙齒類(lèi)動(dòng)物眼底靜脈叢采血必須在麻醉狀態(tài)下進(jìn)行。