藥效學(xué)實(shí)驗中心

通便功能動(dòng)物實(shí)驗評價(jià)方法

1 實(shí)驗項目

1.1小腸運動(dòng)實(shí)驗

1.1.1實(shí)驗原理：

經(jīng)口灌胃給予造模藥物復方地芬諾酯或洛哌丁胺，建立小鼠小腸蠕動(dòng)抑制模型，計算一定時(shí)間內小腸的墨汁推進(jìn)率，來(lái)判斷模型小鼠胃腸蠕動(dòng)功能。

1.1.2實(shí)驗方法

選用成年健康雄性小鼠，體重在18-22g，每組10-15只。實(shí)驗設三個(gè)劑量組，一個(gè)陰性對照組，一個(gè)模型對照組，必要時(shí)設陽(yáng)性對照組。陰性對照組和模型對照組同樣途徑給溶劑。受試樣品連續給予時(shí)間7天，各組小鼠禁食不禁水 20小時(shí)。模型對照組和三個(gè)劑量組灌胃給予復方地芬諾酯5-6mg/kg BW，陰性對照組給蒸餾水。給復方地芬諾酯或洛哌丁胺0.5小時(shí)后，劑量組灌胃給予含相應濃度受試樣品的墨汁，陰性和模型對照組給墨汁灌胃。25分鐘后立即脫頸椎處死動(dòng)物，打開(kāi)腸腔分離腸系膜，剪取上端自幽門(mén)、下端至回盲部的腸管，置于托盤(pán)上，輕輕將小腸拉成直線(xiàn)，測量腸管長(cháng)度為“小腸總長(cháng)度”，從幽門(mén)至墨汁前沿為“墨汁推進(jìn)長(cháng)度”。

1.2排便時(shí)間、糞便粒數和糞便重量的測定

1.2.1原理：

經(jīng)口灌胃給予造模藥物復方地芬諾酯或洛哌丁胺，建立小鼠便秘模型，測定小鼠首粒排黑便排便時(shí)間、5或6小時(shí)內排便粒數和排便重量，來(lái)反映模型小鼠的排便情況。

1.2.2實(shí)驗方法

選用成年健康雄性小鼠，體重在18-22g，每組10-15只。實(shí)驗設三個(gè)劑量組，一個(gè)陰性對照組和一個(gè)模型對照組，必要時(shí)設陽(yáng)性對照組?？瞻讓φ战M和模型對照組同樣途徑給溶劑。受試樣品連續給予時(shí)間7天，各組小鼠禁食不禁水 20小時(shí)。陰性對照組給蒸餾水，模型對照組和三個(gè)劑量組灌胃給予復方地芬諾酯10-12mg/kg BW。給復方地芬諾酯0.5小時(shí)后，陰性對照組和模型對照組小鼠用墨汁灌胃，劑量組灌胃給予含相應濃度受試樣品的墨汁，動(dòng)物單籠飼養，正常飲水進(jìn)食。從灌墨汁開(kāi)始，記錄每只動(dòng)物首粒排黑便時(shí)間、5或6小時(shí)內排便粒數及重量。

2 實(shí)驗原則

2.1 動(dòng)物實(shí)驗和人體試食實(shí)驗所列指標均為必做項目。

2.2 實(shí)驗中復方地芬諾酯或洛哌丁胺的造模劑量應通過(guò)預實(shí)驗確定。

2.3 除對便秘模型動(dòng)物各項必測指標進(jìn)行觀(guān)察外，還應對正常動(dòng)物進(jìn)行觀(guān)察，不得引起動(dòng)物明顯腹瀉。

2.4 排便實(shí)驗中模型成立的條件為排首粒黑便時(shí)間、5或6小時(shí)內排糞便重量和糞便粒數與陰性對照組差異均有顯著(zhù)性。

2.5排便次數的觀(guān)察時(shí)間實(shí)驗前后應保持一致。

3 動(dòng)物實(shí)驗結果判定

五到六小時(shí)內排糞便重量和糞便粒數任一項結果陽(yáng)性，同時(shí)小腸運動(dòng)實(shí)驗和排便時(shí)間任一項結果陽(yáng)性，可判定該受試樣品通便功能動(dòng)物實(shí)驗結果陽(yáng)性。